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顯微鏡的相片是利用入射電子束與它作用后的透射電子作為信號,依靠數(shù)碼顯微鏡將其聚焦成像,并經(jīng)多級放大,后在熒光顯微鏡或照相底片上給出所要的圖象。
在使用奧林巴斯顯微鏡拍照時(shí),首先要根據(jù)使用者要求,調(diào)整適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。在物鏡的辨別中,以往只根據(jù)物鏡上所標(biāo)的數(shù)字去辨認(rèn)。作者總結(jié)出更簡單的辨認(rèn)方法:一是從物鏡的長短辨別,長者為高倍,短者為低倍。二是根據(jù)顏色標(biāo)記上辨認(rèn),帶有黃周的為低倍10x,帶有綠周的為低倍20 x,帶有藍(lán)圈的為高倍40,帶有白圈的為更高倍100x。按照這兩種方法去辨認(rèn)物鏡的放大倍數(shù),簡便易行,明顯地縮短了選用所需物鏡的時(shí)間。
奧林巴斯顯微鏡攝影拍照有以下五個(gè)程序,請廣大用戶需要注意:
1、光源接通,顯微鏡開關(guān)只“開”狀態(tài),電壓調(diào)節(jié)在3~5伏;
2、相差顯微鏡與環(huán)狀光闌相匹配(即10倍相差物鏡與10倍環(huán)狀光闌配用);
3、標(biāo)本置載物臺上,用10倍目鏡調(diào)焦后,將攝影標(biāo)記部位移入取景框中心位置;
4、輕輕旋轉(zhuǎn)觀察器刻度端的視度補(bǔ)償環(huán),取景框內(nèi)雙十字線清晰,調(diào)焦使標(biāo)本清晰,再次用眼環(huán)視一下雙十字線與圖像,兩者同時(shí)清晰時(shí)即可曝光;
5、實(shí)驗(yàn)完畢,電壓下降至零位,關(guān)閉電源。
需要特別注意:
1、高數(shù)值孔徑的物鏡和低數(shù)值照相目鏡組合可以提高物像反差;
2、相差顯微鏡可以用于活體材料和固定材料的研究。標(biāo)本材料厚度應(yīng)小于20微米,載玻片厚度在1毫米左右,若玻片過厚,亮環(huán)與相板的圓環(huán)不能合軸。
3、聚焦問題
轉(zhuǎn)動粗調(diào)手輪,使載物臺降至低位置,將標(biāo)本放在載物臺上,用標(biāo)本片夾固定。把10x物鏡切入光路對樣品聚焦,將聚光鏡升至高位置。縮小視場光闌,在視場中可見邊緣模糊的視場光闌圖像,微降聚光鏡,至視場光闌的圖像清晰聚焦為止。用聚光鏡兩個(gè)調(diào)中的螺桿把縮小的視場光闌圖像調(diào)至視場中心,開放視場光闌直到光闌圖像周邊與視場邊緣相接。
4、物鏡與玻片距離
掌握好不同放大倍數(shù)的物鏡與玻片的大致距離很重要。在使用10x物鏡時(shí),物距在1cm 左右。在使用高倍物鏡時(shí),其物距的臨界值在1mm左右,在臨界值附近密切注視顯微鏡內(nèi)視野變化,從而提高找到清晰物像的速度。
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